Исследование субпопуляции CD3+ CD4- CD8- даблнегативных Т-лимфоцитов у пациентов после трансплантации почки

Введение. CD3⁺CD4^- CD8^- являются одной из субпопуляций T-регуляторных лимфоцитов. Согласно данным литературы, обнаружено увеличение содержания графт-инфильтрирующих CD3+CD4- CD8- в тканях ксенотрансплантата сердца экспериментальной модели с длительной выживаемостью трансплантата. Описана эффективность инфузии CD3⁺CD4^- CD8^- с целью индуцирования толерантности трансплантата кожи. Показано также, что снижение уровня CD3⁺CD4^- CD8^- в периферической крови у пациентов при трансплантации гемопоэтических стволовых клеток ассоциировалось с развитием реакции трансплантат против хозяина.

Цель исследования. Изучить изменения показателей CD3⁺CD4^- CD8^- даблнегативных Т-лимфоцитов в периферической крови у реципиентов почечного трансплантата.

Материал и методы. В исследование включены 165 реципиентов, которым выполнена трансплантация почки. Определяли концентрацию в крови креатинина и мочевины перед операцией, на 7-е и 360-е сутки после трансплантации. Содержание CD3⁺CD4^- CD8^- лимфоцитов изучали перед операцией, на 3-и, 7-е, 30-е, 90-е, 180-е и 360-е сутки после операции. Ранняя функция трансплантата оценивалась на 7-е сутки после операции. При уровне креатинина ниже 300 мкмоль/л функция считалась первичной. Дисфункция трансплантата считалась установленной при значениях креатинина равных или превышающих 300 мкмоль/л и необходимости в диализе на первой неделе после операции. Удовлетворительная функция трансплантата через год характеризовалась уровнем креатинина в крови ниже 150 мкмоль/л, отсутствием эпизодов отторжения трансплантата и необходимости в диализе на первом году наблюдения. Сформированы четыре группы реципиентов. Первая группа – пациенты с первичной и удовлетворительной поздней функцией трансплантата. Вторая группа – с первичной функцией и поздней дисфункцией трансплантата. Третья группа – с первичной дисфункцией и поздней удовлетворительной функцией. Четвертая группа – с первичной и поздней дисфункцией трансплантата.

Результаты. В первой и второй группах статистически значимых различий по уровню CD3⁺CD4- CD8^- в крови в течение года выявлено не было. Через год отмечено статистически значимое снижение содержания CD3⁺CD4^- CD8^- в группе с поздней дисфункцией трансплантата. В третьей и четвертой группах была выявлена похожая тенденция. В четвертой группе (с поздней дисфункцией трансплантата) уровень CD3⁺CD4^- CD8^- был статистически значимо ниже только через год наблюдения по сравнению с показателем в третьей группе. Отмечены отрицательные корреляционные связи между показателями CD3⁺CD4^- CD8^- и уровнем креатинина и мочевины. Таким образом, высокие значения содержания CD3⁺CD4^- CD8^- у реципиентов почечного трансплантата через год ассоциировались с удовлетворительной функцией трансплантата.

Выводы. 1. Для стабильной годовой удовлетворительной функции почечного трансплантата характерно повышение уровня в крови CD3⁺CD4^- CD8^- Т-лимфоцитов. 2. Дисфункция почечного трансплантата в позднем посттрансплантационном периоде характеризуется снижением уровня в крови CD3⁺CD4^- CD8^- Т-лимфоцитов.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

1. Gao JF, McIntyre MS, Juvet SC, Diao J, Li X, Vanama RB, et al. Regulation of antigen-expressing dendritic cells by double negative regulatory T cells. Eur J Immunol. 2011;41(9):2699– 708. PMID: 21660936 https://doi.org/10.1002/eji.201141428

2. Sakaguchi S, Miyara M, Costantino CM, Hafler DA. FOXP3+ regulatory T cells in the human immune system. Nat Rev Immunol. 2010;10(7):490–500. PMID: 20559327 https://doi.org/10.1038/nri2785

3. Zhang Z, Yang L, Young K, DuTempl e B, Zhang L. Identification of a previously unknown antigen-specific regulatory T cell and its mechanism of suppression. Nat Med. 2000;6(7):782–789. https://doi.org/10.1038/77513

4. Brandt D, Hedrich CM. TCR(+) CD3(+)CD4(-)CD8(-) (double negative) T cells in autoimmunity. Autoimmun Rev. 2018;17(4):422–430. PMID: 29428806 https://doi.org/10.1016/j. autrev.2018.02.001

5. Ford MS, Chen W, Wong S, Li C, Vanama R, Elford AR, et al. Peptide-activated double-negative T cells can prevent autoimmune type-1 diabetes development. Eur J Immunol. 2007;37(8):2234– 41. PMID: 17578845 https://doi.org/10.1002/eji.200636991

6. Chen W, Ford MS, Young KJ, Cybulsky MI, Zhang L. Role of double-negative regulatory T cells in long-term cardiac xenograft survival. J Immunol. 2003;170(4):1846–53. PMID: 12574350 https://doi.org/10.4049/jimmunol.170.4.1846

7. Voelkl S, Gary R, Mackensen A. Characterization of the immunoregulatory function of human TCR-+ CD4- CD8- double-negative T cells. Eur J Immunol. 2011;41(3):739–48. PMID: 21287552 https://doi.org/10.1002/eji.201040982

8. Zhang D, Yang W, Degauque N, Tian Y, Mikita A, Zheng XX. New differentiation pathway for double-negative regulatory T cells that regulates the magnitude of immune responses. Blood. 2007;109(9):4071–9. PMID: 17197428 https://doi.org/10.1182/blood-2006-10- 050625

9. Chen W, Zhou D, Torrealba JR, Waddell TK, Grant D, Zhang L. Donor lymphocyte infusion induces long-term donor-specific cardiac xenograft survival through activation of recipient double-negative regulatory T cells. J Immunol. 2005;175(5):3409–16. PMID: 16116235 https://doi.org/10.4049/jimmunol.175.5.3409

10. Hillhouse EE, Beauchamp C, ChabotRoy G, Dugas V, Lesage S. Interleukin-10 limits the expansion of immunoregulatory CD4-CD8- T cells in autoimmuneprone non-obese diabetic mice. Immunol Cell Biol. 2010;88(8):771–80. PMID: 20603635 https://doi.org/10.1038/icb.2010.84

11. Zhang ZX, Ma Y, Wang H, Arp J, Jiang J, Huang X, et al. Double-negative T cells, activated by xenoantigen, lyse autologous B and T cells using a perforin/granzyme-dependent, FasFas ligand-independent pathway. J Immunol. 2006;177(10):6920–9. PMID: 17082607 https://doi.org/10.4049/jimmunol.177.10.6920

12. Chen W, Diao J, Stepkowski SM, Zhang L. Both infiltrating regulatory T cells and insufficient antigen presentation are involved in long-term cardiac xenograft survival. J Immunol. 2007;179(3):1542–8. PMID: 17641020 https://doi.org/10.4049/jimmunol.179.3.1542

13. Chen W, Ford MS, Young KJ, Zhang L. Infusion of in vitro-generated DN T regulatory cells induces permanent cardiac allograft survival in mice. Transplant Proc. 2003;35(7):2479–80. PMID: 14611991 https://doi.org/10.1016/j. transproceed.2003.08.030

14. Young KJ, DuTemple B, Phillips MJ, Zhang L. Inhibition of graft-versus-host disease by double-negative regulatory T cells. J Immunol. 2003;171(1):134– 41. PMID: 12816991 https://doi.org/10.4049/jimmunol.171.1.134

15. McIver Z, Serio B, Dunbar A, O'Keefe CL, Powers J, Wlodarski M, et al. Double-negative regulatory T cells induce allotolerance when expanded after allogeneic haematopoietic stem cell transplantation. Br J Haematol. 2008;141(2):170–8. PMID: 18318770 https://doi.org/10.1111/j.1365-2141

16. Young KJ, Kay LS, Phillips MJ, Zhang L. Antitumor activity mediated by double-negative T cells. Cancer Res. 2003;63(22):8014–21. PMID: 14633734.

17. Sakaguchi S, Yamaguchi T, Nomura T, Ono M. Regulatory T cells and immune tolerance. Cell. 2008;133(5):775– 787. PMID: 18510923 https://doi.org/10.1016/j.cell.2008.05.009

18. Chen W, Ford MS, Young KJ, Zhang L. The role and mechanisms of double negative regulatory T cells in the suppression of immune responses. Cell Mol Immunol. 2004;1(5):328–35. PMID: 16285891.

19. Ford McIntyre MS1, Gao JF, Li X, Naeini BM, Zhang L. Consequences of double negative regulatory T cell and antigen presenting cell interaction on immune response suppression. Int Immunopharmacol. 2011;11(5):597– 603. https://doi.org/10.1016/j. intimp.2010.11.015

20. Cantaluppi V, Dellepiane S, Tamagnone M, Medica D, Figliolini F, Messina M, et al. Neutrophil gelatinase associated lipocalin is an early and accurate biomarker of graft function and tissue regeneration in kidney transplantation from extended criteria donors. PLoS One. 2015;10(6):e0129279. PMID: 26125566 https://doi.org/10.1371/journal.pone.0129279

21. Massart A, Ghisdal L, Abramo wicz M, Abramowicz D. Operational tolerance in kidney transplantation and associated biomarkers. Clin Exp Immunol. 2017;189(2):138–157. PMID: 28449211 https://doi.org/10.1111/cei.12981